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金黄色葡萄球菌的检验方法

文章作者:优博时时彩平台开户发布时间:2020-01-03浏览次数:1801

金黄色葡萄球菌试验方法步骤

1.浓缩培养方法

(1)样品处理:无菌取出25g(ml)样品,加入225mL无菌生理盐水,将固体样品研磨或置于均化器中以制备悬浮液。

(2)富集和分离培养:移取5ml上述悬浮液,接种于50mL 7.5%氯化钠肉汤或胰大豆肉汤培养基中,于36℃在1℃下孵育1小时,转移至血液板上。将Baird-Parker板在36℃下在24℃下培养1小时。挑选血板上的金黄色(有时是白色)菌落用于革兰氏染色显微镜检查和血浆凝固酶试验。

(3)形态学:细菌为革兰氏阳性球菌,排列成葡萄状,无孢子,无胶囊,病原性葡萄球菌细小,直径约0.5um至1um。

(4)它在肉汤中生长浑浊,有时液体在胰痰和大豆肉汤中澄清。当细菌数量很大时,它会变得混浊。血板上的菌落为金黄色,有时为白色,大而突出,圆形,不透明,表面光滑,周围有溶血圈。在Baird-Parker板上,它是圆形,光滑,潮湿,直径为2mm 3mm,颜色为灰色至黑色,颜色浅,外层为浑浊带和透明环。接触针接触菌落似乎有奶油胶的硬度,偶尔遇到类似不溶脂的菌落;但没有浑浊的腰带和透明的地图。在长期保存的冷冻或干燥食品中分离的菌落比典型菌落产生的黑色轻,并且外观可能粗糙和干燥。

(5)血浆凝固酶试验:将0.5 mL新鲜兔血浆移入小试管中,加入0.5 mL金黄色葡萄球菌肉浸液,孵育0.5 h。摇匀并摇晃。在36°C 1°C的培养箱或水浴中,每半小时观察一次,观察6h,如果有凝固,即当试管倾斜或倒置时,凝块存在并被认为是阳性结果。同时,使用已知的阳性和阴性葡萄球菌菌株和肉汤作为对照。

2,直接计数法6.2.1取上述1:10悬浮液,稀释10倍,根据样品污染情况,选择1mL不同浓度的稀释剂,分别加入3个Baird-Parker板,每个板的接种量为0.3分别为mL,0.3mL和0.4mL,然后用灭菌的L棒涂覆整个板。如果水不易吸收,可将板放置在36°C±1°C lh,水蒸发,板在36°C±1°C倒置。

选择在三个平板周围具有浊带的黑色菌落,从中选择5个菌落,分别接种血液平板。将细胞在36℃下培养1小时,持续24小时,然后进行染色显微镜检查和血浆凝固酶试验。法。

3,菌落计数:在三个平板中怀疑金黄色葡萄球菌黑色菌落的数量,乘以血浆凝固酶阳性数,除以5,再乘以稀释因子,即可找到每克金黄色葡萄样品数量球菌。

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